เด็กหนุ่มปีเตอร์ ปาร์กเกอร์ ผู้ถูกแมงมุมดัดแปลงพันธุกรรมกัดระหว่างทัศนศึกษา ต้องเผชิญกับพลังพิเศษที่เปลี่ยนชีวิตเขาไปตลอดกาล เมื่อลุงเบนผู้เป็นที่รักจากไปเพราะเหตุการณ์ที่เขาหลีกเลี่ยงได้ ปีเตอร์จึงเรียนรู้ว่าพลังอันยิ่งใหญ่มาพร้อมความรับผิดชอบอันใหญ่หลวง ขณะเดียวกันเขาต้องรับมือกับความรักที่มีต่อเอ็ม เจ และศัตรูตัวฉกาจกรีนก็อบลินที่หมายทำลายนิวยอร์ก สไปเดอร์แมนจึงถือกำเนิดขึ้นเพื่อปกป้องผู้คนและค้นหาความหมายของความเป็นฮีโร่ที่แท้จริง
